BAFF Western blot實驗檢測

BAFF Western blot實驗檢測

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B細胞活化因子屬腫瘤壞死因子超家族成員(TNFSF13B)，主要由單核細胞、樹突狀細胞及T細胞產(chan) 生，可促進B細胞成熟和分化，在免疫應答中起重要作用，並與(yu) 自身免疫密切相關(guan) 。膜型BAFF主要表達於(yu) 抗原提呈細胞，蛋白酶可使之水解而轉變為(wei) 可溶性BAFF。

通常檢測BAFF的時候可以一起檢測BCL-1，NF-KB等指標一起檢測。

Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然後利用抗體(ti) 進行檢測的方法。對已知表達蛋白，可用相應抗體(ti) 作為(wei) 一抗進行檢測，對新基因的表達產(chan) 物，可通過融合部分的抗體(ti) 檢測。

BAFF Western blot實驗檢測

與(yu) Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，“探針”是抗體(ti) ，“顯色”用標記的二抗。

經過PAGE分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體(ti) （例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體(ti) 以非共價(jia) 鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體(ti) 上的蛋白質或多肽作為(wei) 抗原，與(yu) 對應的抗體(ti) 起免疫反應，再與(yu) 酶或同位素標記的第二抗體(ti) 起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用於(yu) 檢測蛋白水平的表達。

注意事項：

1.  一抗、二抗的稀釋度、作用時間和溫度對不同的蛋白要經過預實驗確定*條件。
 

2.  顯色液必須新鮮配置使用，zui後加入H₂O₂。
 

3.  DAB有致癌的潛在可能，操作時要小心仔細。