可溶性E選擇素ky体育在线登陆簡介

可溶性E選擇素(sE-selectin))ky体育在线登陆基本信息

E選擇素即CD62E。主要表達於(yu) 活化的內(nei) 皮細胞，可介導多形核白細胞與(yu) 內(nei) 皮細胞的起始黏附。

中文名稱E選擇素

英文名稱E-selectin

定　　義(yi) 即CD62E。主要表達於(yu) 活化的內(nei) 皮細胞，可介導多形核白細胞與(yu) 內(nei) 皮細胞的起始黏附。

應用學科 免疫學（一級學科），免疫係統（二級學科），免疫分子（三級學科）

可溶性E選擇素(sE-selectin))ky体育在线登陆檢測技術簡介

雙抗體(ti) 夾心法

　　1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩衝(chong) 液將抗體(ti) 稀釋至蛋白質含量為(wei) 1～10μg/ml。在每個(ge) 聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nei) 溶液，用洗滌緩衝(chong) 液洗3次，每次3分鍾。（簡稱洗滌，下同）。

　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml於(yu) 上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然後洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

　　3.　加酶標抗體(ti) ：於(yu) 各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(ti) （經滴定後的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

　　4.　加底物液顯色：於(yu) 各反應孔中加入臨(lin) 時配製的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鍾。

　　5.　終止反應：於(yu) 各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6.　結果判定：可於(yu) 白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nei) 顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為(wei) 無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀(yi) 上，於(yu) 450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零後測各孔OD值，若大於(yu) 規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為(wei) 陽性。

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