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做Western實驗時,各種裂解液怎麽選擇

更新時間:2017-02-28      瀏覽次數:3776

Western 及 IP細胞裂解液、RIPA裂解液、NP-40裂解液、SDS裂解液的用途?
 
用於(yu) 普通的Western 、IP或co-IP,我們(men) 推薦使用Western及IP細胞裂解液,該裂解液已被國內(nei) 各大研究機構廣泛使用,用戶普遍反映很好。裂解細胞或組織後,沒有非常粘滯的透明狀DNA團塊形成,不必采用超聲處理等就可以非常理想地用於(yu) 後續操作。

另外該裂解液裂解的產(chan) 物也適合用於(yu) 磷酸化,蛋白的Western 檢測。對於(yu) 某些特殊蛋白的IP,如果發現Western及IP細胞裂解液效果不是非常理想,可以嚐試用RIPA裂解液(強、中或弱)或NP-40裂解液。如果發現IP的時候背景很高,即非特異的蛋白也被IP下來,則需要選用裂解強度較高的裂解液,例如RIPA裂解液(強或中)。

如果發現目的蛋白無法被IP下來,則說明裂解液的強度過強,可以使用較為(wei) 溫和的裂解液如RIPA裂解液(弱)或NP-40裂解液。對於(yu) 某些難溶解蛋白的Western,如果發現Western及IP細胞裂解液效果不是非常理想,可以嚐試使用裂解強度更高的裂解液,例如RIPA裂解液(強、中)或SDS裂解液。

上海信帆生物代做各類Western實驗,歡迎大家!

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