ky体育亚洲杯 全國谘詢熱線：13764793648
PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類
更新時間：2016-12-27 
瀏覽次數：1936(一)、ABC法：(注，下麵各種方法，均為(wei) 手工操作，如沒特別說明，均在室溫下進行)
1.切片經二甲苯Ⅰ 5分鍾。
2.切片經二甲苯Ⅱ 5分鍾。
3. *Ⅰ 30秒。
4. *Ⅱ 30秒。
5. 95%酒精Ⅰ 30秒。
6. 95%酒精Ⅱ 30秒。
7. 90%酒精 30秒。
8.80%酒精 30秒。
9. 70%酒精 30秒。
10.自來水洗。(後麵的切片脫蠟至水一般都是1-10)
11.0.3%H2O2甲醇處理切片10-20分鍾。
12.水洗。
13.抗原修複。
14.PBS洗3次，1分鍾/次。
15.加入血清孵育20分鍾。
16.摔幹血清，加入一抗60分鍾。
17.PBS洗3次，2分鍾/次。
18.加入二抗孵育30分鍾。
19.PBS洗3次，2分鍾/次。
20.加入ABC複合物，孵育30分鍾。
21. PBS洗3次，2分鍾/次。
22.DAB-H2O2孵育切片5-10分鍾。
23.PBS洗，水洗。
24.Harris蘇木素染核5-10分鍾。
25.水洗，分化，藍化，脫水，透明並封固。
(二)、LSAB法。(SP法)(Labelled streptavidim biotln)
1.切片脫蠟至水。
2.0.3%H2O2甲醇處理切片10-20分鍾。
3.水洗。
4.抗原修複。
5.PBS洗3次，1分鍾/次。
6.加入血清孵育10分鍾。
7.摔去血清，加入一抗孵育30-60分鍾。
8.PBS洗3次，每次2分鍾。加入二抗，孵育20分鍾。
9.PBS洗3次，每次2分鍾。
10.加入SP複合物孵育20-30分鍾。
11.PBS洗3次，每次2分鍾。
12.DAB-H2O2孵育5-10分鍾。
13.PBS洗，水洗。
14.Harris蘇木素染核5-10分鍾。
15.水洗，分化 ，藍化，脫水，透明並封固。
(三)真空負壓LSAB法
1.切片脫蠟至水。
2. 0.3%H2O2甲醇真空負壓處理5min.
3. 水洗。
4.如果需要，可進行抗原修複。
5.PBS洗3次，每次1分鍾。
6.加入正常血清真空負壓處理5min。
7.摔幹血清，加入*抗體(ti) ，真空負壓處理5分鍾。
8. PBS洗3次，每次2分鍾。
9. 加入二抗(即連接抗體(ti) )真空負壓處理5分鍾。
10.PBS洗3次，每次2分鍾。
11.加入鏈卵蛋白複合物，真空負壓處理 5分鍾。
12.PBS洗3次，每次2分鍾。
13.DAB-H2O2孵育5-10分鍾。
14.PBS洗，水洗。
15.染核，分化，藍化，脫水，透明並封固。
注：真空負壓即將真空幹燥中抽成真空。負壓達66.7KPa(500mmHg)
(四)Envision TM Systems.
1.切片脫蠟至水。
2.0.3%H2O2甲醇處理切片10分鍾。
3.水洗。
4.抗原修複。
5.PBS洗3次，每次1分鍾。
6.加入一抗體(ti) 孵育30-60分鍾。
7.PBS洗3次，每次2分鍾。
8.加入增強劑孵育20-30分鍾。
9.PBS洗3次，每次2分鍾。
10.加入酶標抗兔/鼠，複合物，孵育20-30分鍾。
11.PBS洗3次，每次2分鍾。
12.DAB-H2O2孵育5-10分鍾。
13.PBS洗，水洗。
14.Harris蘇木素染核5-10分鍾。
15.水洗，分化，藍化，脫水，透明並封固。
(五)免疫組化雙染色法。(ⅰ) (Ionmuno-Histochemistry double staimimg method)
1.切片脫蠟至水。
2.0.3%H2O2甲醇處理切片10分鍾。
3.水洗。
4.抗原修複。
5.PBS洗3次，每次1分鍾。
6.加入非免疫性動物血清，孵育10分鍾。
7.PBS洗3次，每次2分鍾。
8.加入*抗體(ti) 孵育60分鍾。
9.PBS洗3次，每次2分鍾。
10.加入生物素化的第二抗體(ti) ，孵育10分鍾。
11.PBS洗3次，每次2分鍾。
12.加入鏈卵蛋白素過氧化物酶孵育10分鍾。
13.PBS洗3次，每次2分鍾。
14.加入DAB-H2O2孵育5-10分鍾。
15.PBS洗3次，每次2分鍾。
16. 加入雙染增強液，孵育10分鍾。
17. 加入非免疫性動物血清孵育10分鍾。
18. PBS洗3次，每次2分鍾。
19. 加入選用的第二種抗體(ti) 孵育60分鍾。
20. PBS洗3次，每次2分鍾。
21. 加入生物素標記的第二抗體(ti) 孵育10分鍾。
22. PBS洗3次，每次2 分鍾。
23. 加入鏈卵蛋白素堿性磷酸酶孵育10分鍾。
24. PBS洗3次，每次2分鍾。
25. 加入AEC溶液，孵育5-10分鍾。
26. 自來水洗。
27. 蘇木素染核5-10分鍾。
28. 水性封片。
注：1.*種複合物也可先用鏈卵蛋白素堿性磷酸酶。
2.第1次顯色也可用BCIP/NBT溶液，顏色為(wei) 藍黑色，但應與(yu) 蘇木素鑒別。
(六)、免疫組化的雙染色法(ⅱ) (Immuno-histochemistry double staining method)
1.切片脫蠟至水。
2.0.3%H2O2甲醇處理切片10分鍾。
3.水洗。
4.抗原修複。
5.PBS洗3次，每次1分鍾。
6.加入選用的*抗體(ti) 孵育30-60分鍾。
7.PBS洗3次，每次2分鍾。
8.加入增強劑孵育20-30分鍾。
9.PBS洗3次，每次2分鍾。
10.加入酶標抗兔/鼠，複合物，孵育
11.PBS洗3次，每次2分鍾。
12.加入DAB-H2O2孵育5-10分鍾
13.PBS洗3次，每次2分鍾。
14.加入選用的第二種抗體(ti) 孵育60分鍾。
15.PBS洗3次，每次2分鍾。
16. 加入增強劑孵育20-30分鍾。
17. PBS洗3次，每次2分鍾。
18. 加入酶標抗兔/鼠堿性磷酸酶複合物孵育20-30分鍾。
19.PBS洗3次，每次2分鍾。
20.加入AEC溶液孵育5-10分鍾。
21.自來水洗。
22.蘇木素染核5-10分鍾。
23.水性封片。
(七)細胞培養(yang) 片免疫熒光染色法。
1.將細胞於(yu) 載片或蓋玻片的片子用生理鹽水洗幾次。
2.純丙酮固定10分鍾。
3.PBS浸洗3次，每次1分鍾。
4.加入選用的*抗體(ti) 孵育120分鍾。
5.PBS洗3次，每次2分鍾。
6.加入熒光抗體(ti) 孵育60分鍾以上。
7.PBS法3次，每次2分鍾。
8.0.1%伊文氏藍襯染3分鍾。
9.水洗，蒸餾水洗。
10. 水性膠封片或用緩衝(chong) 甘油封片。
(八)真空負壓免疫熒光染色法染細胞培養(yang) 片。
1. 將細胞爬於(yu) 載玻片或蓋玻片的片子用生理鹽水浸洗數次，*洗去蛋白液。
2.純丙酮固定5-10分鍾。
3.PBS浸洗3次，每次1分鍾。
4.加入選用的*抗體(ti) 孵育真空負壓處理15分鍾。
5.PBS洗3次，每次2分鍾。
6.加入熒光抗體(ti) 孵育真空負壓處理15分鍾。
7.PBS洗3次，每次2分鍾。
8.0.1%伊文氏藍襯染3分鍾。
9.水洗，蒸餾水洗。
10.水性膠封片或用緩衝(chong) 甘油封片。
您的位置：
