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你知道怎樣操作Elisa試劑盒嗎?

更新時間:2021-11-26      瀏覽次數:761
   Elisa試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,然而實驗新手們麵對各種各樣、動則上上千種的Elisa試劑盒,內心應該是崩潰的。
  Elisa試劑盒的操作步驟
  (一)樣品準備
  1.取動物全血按常規方法製備血清,要求血清清亮,無溶血、無汙染。樣品1周內可於2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
  2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
  3.濃縮洗滌液使用前應恢複至室溫使沉澱溶解,然後用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
  (二)檢驗方法
  1.使用前將試劑盒置室溫30分鍾,恢複至室溫。
  2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
  3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋後的樣品100μl。
  4.混勻,置37℃反應30分鍾。
  5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,重複洗滌5次,拍幹。
  6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鍾。
  7.洗滌,同步驟5。
  8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鍾。
  9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,於450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
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