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細胞中的鐵離子檢測試劑盒這麽操作更準確

更新時間:2021-03-31      瀏覽次數:4176

細胞中的鐵離子檢測試劑盒這麽(me) 操作更準確

上海信帆生物供應鐵離子檢測試劑盒,操作簡單,適應樣本多樣,我們(men) 還供應血清鐵檢測試劑盒,組織鐵檢測試劑盒,鐵蛋白試劑盒等等!

描述:鐵是人體(ti) 必需的元素之一,對人體(ti) 的新陳代謝和身體(ti) 健康具有重要作用,血液中鐵的含量不足,就會(hui) 造成缺鐵性貧血。鐵存在於(yu) 人體(ti) 所有的細胞內(nei) ,各組織、器官包括各內(nei) 分泌腺都含有鐵。肝髒、脾髒和肺組織內(nei) 含量較為(wei) 豐(feng) 富。成人體(ti) 內(nei) 含鐵35克,大部分都以蛋白質複合物形式存在,極少部分以離子的形態存在。本試劑盒采用亞(ya) 鐵嗪比色法可以定量細胞鐵離子,線性範圍5~300uM。產(chan) 品包括標準品和空白對照,本試劑盒可進行100個(ge) 樣品的檢測。

規格:100

儲(chu) 存:4保存  6個(ge) 月有效

操作步驟:

1. 樣品準備(以24孔板為(wei) 例):

將含鐵元素DMEM培養(yang) 過的細胞用冷的PBS 2ml洗兩(liang) 遍,將PBS吸棄(若不馬上檢測可將其凍存於(yu) -20)。200ul/孔裂解液裂解細胞,置於(yu) 搖床裂解2h

2. 標準品的稀釋:用試劑盒提供的稀釋用液將3mM 的標準品母液稀釋為(wei) :300 uM150uM75uM37.5uM18.75uM9.38uM4.69uM。注意倍比稀釋並設置0濃度對照反應管。

3. 將緩衝(chong) 液與(yu) 4.5%高錳酸鉀溶液按1:1混勻,稱為(wei) 混液A 注意:高錳酸鉀溶液需要自備。

4. 參考下表使用1.5ml離心管,設置空白對照管、標準品管和樣品管。如果樣品中的鐵元素含量過高,用裂解液適當稀釋後再進行測定。

 

空白對照

稀釋後的標準品

裂解的樣品

稀釋用液

100μl

 

混液A

100μl

100μl

100μl

樣品

100μl

標準品工作液

100μl

 

 

5. 混勻,60 孵育1h

6. 冷卻至室溫,將管蓋與(yu) 管壁上的液滴離心入管底。

7. 加入30ul 鐵離子檢測劑,混勻,室溫孵育,30min

8. 200ul 於(yu) 96孔板,在550nm測定吸光度。如果不能測定550nm,也可以在540nm~580nm範圍內(nei) 檢測。

9. 繪製標準曲線並計算鐵離子濃度。

 

說明:

1. 本試劑盒不受錳離子、鎂離子、鎳離子和鋅離子等的幹擾。
2. 操作過程中,樣品與(yu) 試劑等避免與(yu) 鐵器接觸,以防汙染。

3. 所測樣本的值高於(yu) 標準曲線的上限,應稀釋樣品後重新測定。

4. 為(wei) 了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作,檢測試劑有腐蝕性,請小心操作,若不慎沾到皮膚上請馬上用清水衝(chong) 洗幹淨。

5. 該試劑盒僅(jin) 供科學研究使用。

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