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明膠酶譜試劑盒操作注意事項

更新時間:2020-09-01      瀏覽次數:905

明膠酶譜試劑盒操作注意事項

1.製備聚丙烯酰胺時應注意排除氣泡。

2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩衝(chong) 液配製應嚴(yan) 格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。

3.用大梳子

4.孵育液的PH在7.5-7.6,複性的TRITON時間長了會(hui) 有絮狀物,所以實驗時盡量使用新鮮配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培養(yang) 箱中,因為(wei) 會(hui) 改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。

6、組織或者細胞的話可以用PBS,可以用低滲溶液如三分之一或者四分之一的生理鹽水按照5倍體(ti) 積加入後震蕩裂解細胞,離心即可,步驟和提蛋白很相似即可,其實重點的步驟主要是采用低滲裂解液進行裂解,組織的話可以勻漿20-30次,然後10000轉左右離心,5分鍾取上清即可

 

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