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更新時間:2020-07-14
瀏覽次數:2036上海信帆生物開展了麗(li) 春紅如何配置的培訓活動
很多實驗室的同學需要麗(li) 春紅的染色試劑,但是對於(yu) 配置方法並不是特別了解,上海信帆生物正對該染色液的配置特別開展了一次別開生麵的培訓活動,讓大家對這個(ge) 都有了有一個(ge) 全新的認識和了解,下麵讓我們(men) 一起走進培訓室,來了解一下吧!
Molecular Formula: C 22 H 12 N 4 Na 4 O 13 S 4
Molecular Weight::760.6
CAS Number: 6226-79-5
λ : 520 nm (water)
麗(li) 春紅(Ponceau S)也稱猩紅,可以用於(yu) PVDF膜、硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纖維素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的檢測。麗(li) 春紅帶負電荷,可以與(yu) 帶正電荷的氨基酸殘基結合,同時麗(li) 春紅也可以與(yu) 蛋白的非極性區相結合,從(cong) 而形成紅色的條帶。麗(li) 春紅染色的靈敏度不及考馬斯亮藍染色。
麗(li) 春紅對蛋白的染色是可逆的,染色後可以用蒸餾水,PBS或其它適當溶液洗去。因此,蛋白質N端測序時將SDS-PAGE膠上的蛋白轉移到PVDF膜,用麗(li) 春紅染色後將目的條帶切下用於(yu) 測序。
注意:麗(li) 春紅染色液不適用於(yu) 尼龍膜上的蛋白的檢測。
使用說明
將PVDF膜、硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜浸沒在麗(li) 春紅染色液中,搖動5-10分鍾或更長時間;取出印跡膜,用蒸餾水,PBS或其它適當溶液漂洗2-3次,可出現清晰條帶,記錄結果;用蒸餾水,PBS或其它適當溶液漂洗2-3次,每次3-5分鍾,去除麗(li) 春紅,進行後續的WB檢測。
補充:麗(li) 春紅染色液也可以直接用來染PAGE膠,不過,在染色之前好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE膠,起到固定蛋白的作用。
麗(li) 春紅染色液的配製
常用的麗(li) 春紅染色液有兩(liang) 種:一種用乙酸配製,另外一種用三氯yi酸(TVA)和5-磺基水楊酸(5-Sulfosalicylic acid)配製。配製方法如下:
一、用乙酸配製成分:0.1%(w)麗(li) 春紅,5%(v)乙酸,ddH 2 O。
4 ℃保存,不要凍上。也可以配成“0.2%(w)麗(li) 春紅,3%(v)乙酸,ddH 2 O”。
二、用三氯yi酸5-磺基水楊酸成分:2% (w)麗(li) 春紅,30%的三氯yi酸,30%的5-磺基水楊酸。
上海信帆生物開展了麗(li) 春紅如何配置的培訓活動