實惠又好用的金擔子素A現貨

實惠又好用的金擔子素A現貨

上海信帆生物供應金擔子素A，產(chan) 品質量穩定，現貨供應！

金擔子素A（Aureobasidin A，AbA）是從(cong) 絲(si) 狀真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分離出來的環酯肽類抗生素，具有很強的抗真菌能力。AbA作用機製是抑製酵母中AUR1基因（1，2）編碼的肌醇磷酰胺（inositolphosphorylceramide，IPC）合成酶的活性，幹擾鞘脂合成，從(cong) 而殺死菌株。AbA在較低的濃度下（0.1-0.5 μg/mL）即可對酵母產(chan) 生毒性。編碼IPC合成酶的基因研究較多的來自釀酒酵母菌的AUR1基因，以及構巢曲黴的AURA基因，兩(liang) 者具有同源性。通過對編碼AUR1-C基因進行突變即可使得菌株對AbA產(chan) 生抗性，作為(wei) 蛋白質互作研究的報告基因。

因為(wei) AbA可以直接殺死敏感的酵母菌株，而不是延遲菌株生長，所以AbA篩選有利於(yu) 陽性克隆的生長和識別。與(yu) 營養(yang) 報告基因（如HIS3）進行的低嚴(yan) 緊度初篩相比，AbA篩選大大消除了背景克隆。實際操作中，用AbA進行初篩時會(hui) 獲得更多克隆，之後再用4個(ge) 報告子(AUR1-C，HIS3，ADE2和MEL1)進行高嚴(yan) 緊度的二次篩選以驗證陽性克隆。AbA非常適合用作陽性克隆子篩選用的藥物選擇性標記；也是酵母單/雙雜交研究中理想的報告子，可以簡化酵母雙雜交文庫篩選。

二、使用方法：

  1、本品為(wei) AbA的甲醇溶液，濃度為(wei) 1 mg/mL，直接用作儲(chu) 存液。

  2、滅菌後YPD Agar培養(yang) 基（PM2020）冷卻至50-55 ℃，加入適量的AbA儲(chu) 液，倒板備用。

  （AbA工作濃度取決(jue) 於(yu) 宿主細胞的敏感度，見下表） 

  3、製備酵母感受態細胞並完成轉化，參考SK2400，SK2401。

  4、把100 μl完成轉化酵母細胞懸液塗到含有適量AbA的YPD Agar培養(yang) 基平板上，30℃培養(yang) 2-4天。

  5、挑取克隆鑒定，或統計轉化效率。

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