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更新時間:2025-10-10
瀏覽次數:844祝賀湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫院訂購我司產(chan) 品發表文章成功
標題《絞股藍提取物通過調控lncRNA PICSAR對IL-1β誘導軟骨細胞損傷(shang) 的保護作用及機製研究》
摘要:目的探討絞股藍提取物對白介素1β(IL-1β)誘導軟骨細胞損傷(shang) 的作用及分子機製。方法 2020年10月—2021年4月於(yu) 湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫院進行實驗,將關(guan) 節軟骨細胞隨機分為(wei) 對照(NC)組、IL-1β組及絞股藍提取物低、中、高劑量組、IL-1β+si-con組、IL-1β+si-lncRNA PICSAR組、pcDNA-con+高劑量組、pcDNA-lncRNA PICSAR+高劑量組,分別對其進行幹預水平;用細胞計數試劑盒8(CCK-8)檢測細胞活力,流式細胞儀(yi) 檢測細胞凋亡情況,蛋白質印跡(Western-blot)法檢測裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleave-caspase-3)蛋白表達水平;酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性;實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測lncRNA PICSAR表達水平。
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細胞凋亡也可以用流式細胞儀(yi) 觀察細胞光散射的變化來檢測。細胞發生凋亡時,由於(yu) 胞漿和染色質濃縮、核碎裂,產(chan) 生凋亡小體(ti) 。凋亡前期,染色質皺縮,細胞密度增加;凋亡後期,細胞產(chan) 生凋亡小體(ti) ,細胞的光散射均會(hui) 發生變化。
細胞周期與(yu) 凋亡檢測試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)采用了經典的碘化丙啶染色(Propidium staining)方法對細胞周期與(yu) 凋亡進行檢測分析。利用碘化丙啶能夠嵌入雙鏈DNA中,並使其產(chan) 生熒光,並且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比的特性;結合細胞不同周期中,DNA含量的規則變化,可以區分細胞處於(yu) 的周期和狀態。本試劑盒可用於(yu) 組織細胞、貼壁或懸浮細胞的細胞周期與(yu) 凋亡檢測(如用於(yu) 組織的細胞周期與(yu) 凋亡檢測,則須把組織消化成單細胞狀態,才可進行檢測)。