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更新時間:2019-07-05
瀏覽次數:3309CNBr Activated Sepharose 4B,溴化氰活化4B瓊脂糖凝膠
上海信帆生物供應CNBr Activated Sepharose 4B,溴化氰活化4B瓊脂糖凝膠,產(chan) 品備有大量現貨!
偶聯條件溫和,效率高;可偶聯含有氨基的配體(ti) ,應用範圍廣。溴化氰活化4B/6B瓊脂糖凝膠是一種活化中間體(ti) 填料,它是通過溴化氰和瓊脂糖上麵的羥基反應生成活化的氰酸酯基團。蛋白質、多肽、氨基酸等可以偶聯到溴化氰活化4B/6B瓊脂糖凝膠上。
它具有以下優(you) 點:
產(chan) 品指標
產(chan) 品牌號 | 溴化氰活化4B瓊脂糖凝膠 | 溴化氰活化6B瓊脂糖凝膠 |
基質 | seplite 4B | seplite 6B |
顆粒大小 | 平均粒徑90μm(50-160μm) | |
偶聯能力 | 20~60mgα-胰凝乳蛋白酶原/ml凝膠 | |
大線性流量 | 75cm/h(25℃),直徑1.6cm色譜柱,5cm柱床高 | |
高溫高壓 | 不耐受 | |
pH穩定性 | 2–11 | |
化學穩定性 | 常見溶液中可以保持穩定。可以耐受非離子型去汙劑、變性溶劑,如8 M尿素和6 M鹽酸胍。也可以耐受50%二甲基甲酰胺和50%二氧六環等有機溶劑。 | |
保存 | 凍幹粉,2~8℃,幹燥 | |
使用注意事項:
溴化氰活化4B/6B瓊脂糖凝膠是以添加劑的形式凍幹處理得到的。這些添加劑在填料螯合所需的配體(ti) 前必須在低pH(pH 2–3)條件下進行清洗。活化後的活性基團也應該使用低pH值(pH值2–3)保存,而在高pH值則會(hui) 出現降解。
稱取所需量的凍幹粉(1 g凍幹粉可獲得3~5ml終體(ti) 積的填料),使用1mM HCl溶脹。填料會(hui) 很快膨脹,再用1mM HCl在玻璃砂芯漏鬥(G3)中進行清洗15min。每克凍幹粉添加約200ml 1mM的HCl溶脹,實際可以分次添加。
一般配體(ti) 偶聯的過程如下:
(1)將所需要偶聯的配基溶解到 pH 8.3含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/LNaHCO3 緩衝(chong) 溶液中,加入溶脹好的溴化氰活化4B/6B瓊脂糖凝膠。
(2)在室溫中攪拌反應2~4小時或者在4℃下過夜反應。
(3)反應*後,用5倍反應體(ti) 積的偶聯緩衝(chong) 液洗滌掉其中多餘(yu) 的配體(ti) ,10倍體(ti) 積的水洗。
(4)將反應完洗滌過的凝膠懸浮到水中,加入乙醇胺(1mol/L)或者pH8.0的Tris-HCl緩衝(chong) 液,在常溫少攪拌反應2小時,以消除殘餘(yu) 活性基團。
(5)用含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/L醋酸鹽緩衝(chong) 液(PH 4.0)和含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/L Tris-HCl緩衝(chong) 液(PH 8)交替洗滌,至少重複以上循環洗滌3次。用10倍柱體(ti) 積的PBS洗滌。
CNBr Activated Sepharose 4B,CNBr瓊脂糖
溴化氰活化4B瓊脂糖凝膠 |
