胎牛血清采血方法及保存
1、挑選出大約8月齡以上的健康妊娠母牛,經剖腹獲取小牛。
2、將小牛清洗幹淨後,側放在萬級潔淨房間內的采血台上,固定四肢及頭部。
3、用來蘇水清洗心髒外部,刮去心髒外部牛毛,露出心髒外部一側皮膚,用2%碘酒擦拭消毒。
4、在心髒部位切開一道10厘米左右的切口,取出近心血管,先用2%碘酒消毒,再用75%的酒精消毒,用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管後打開血管的止血鉗,讓牛血順采血管流入另一個潔淨房間內的采血瓶中。
5、采血瓶采血前經幹烤滅菌(180℃2小時)後,按無菌操作注入10毫升左右經高壓滅菌的生理鹽水後加塞封口,於采血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采血前先晃動瓶內生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁後倒出,再進行采血並加塞封口。將采血後的采血瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。
采集後的胎牛血清需要冷凍保存,那麽在下一次使用的時候,如何解凍呢?下麵就來說說胎牛血清解凍過程。
(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉澱的發生。
(2)血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉澱。
(4)勿將血清置於37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。
(5)血清的熱滅活非常容易造成沉澱物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(6)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鍾的原則,並且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉澱物的增多。